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细胞划痕实验-第三方检测机构

发布时间： 2024-07-08　　点击次数： 220次

　　细胞划痕实验又叫创伤愈合实验，当细胞生长至融合成单层状态时，在细胞层上人为制造一个空白区域，称为“划痕/伤口”，通过一段时间的培养，边缘的细胞会逐渐向无细胞区域迁移，使“伤口”愈合，通过测量细胞迁移距离及速度反映细胞的迁移能力及修复能力。

　　在化妆品修复功效评价中，细胞划痕实验可以模拟皮肤受损后的自然愈合过程，用于观察化妆品等外源因素对细胞迁移、修复和相互作用的影响。

　　中科检测可开展细胞划痕实验，评估化妆品成分或产品对促进皮肤修复和愈合效果，出具的化妆品修复功效评价报告具有CMA资质。

　　细胞划痕实验应用方向

　　迁移能力：实验中细胞迁移填充划痕区域的速度可以作为评估化妆品促进皮肤愈合的一个指标。在实验中表现出强迁移能力的化妆品成分，可能在实际应用中有助于加快皮肤受损区域的修复。

　　增殖效果：细胞在划痕区域的增殖情况反映了化妆品促进皮肤细胞再生的潜力。增殖效果好的化妆品可能在实际使用中有助于皮肤恢复活力和弹性。

　　安全性评估：通过细胞划痕实验可以初步评估化妆品成分的安全性。如果在细胞水平上没有表现出毒性或负面影响，这为进一步的体内测试和人体试验提供了基础。

　　剂量效应关系：实验中可以测试不同浓度的化妆品成分，以确定有效剂量和安全剂量范围，这有助于指导产品配方的开发。

　　长期效果预测：虽然细胞划痕实验是短期的，但它可以为预测长期皮肤修复效果提供一定的依据。例如，能够显著促进细胞迁移和增殖的成分，可能在实际使用中有助于减少疤痕形成。

　　临床试验：细胞划痕实验的结果需要通过临床试验来验证。临床试验可以在实际皮肤上评估化妆品的效果，包括愈合时间、皮肤质地改善和整体修复效果。

　　综合评估：细胞划痕实验只是评估化妆品修复功效的多种方法之一。它的结果需要与分子水平的研究、动物模型实验以及其他体外实验结果相结合，以全面评价化妆品的功效。

　　细胞划痕实验原理

　　细胞划痕实验是通过在细胞单层上划痕并通过延时显微镜定期捕获图像，从而研究细胞迁移运动、修复能力和细胞间相互作用的实验室技术，基本原理是：在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕/伤口”，划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕/伤口”愈合，于细胞迁移过程中在开始和定期捕获图像，通过测量不同时间点的划痕间距并计算差值，可对细胞的迁移能力做出判断。

　　细胞划痕实验步骤

　　1、准备

　　所有能灭菌的器械都要灭菌，包括直尺(或者24孔板盖)和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)。

　　2、流程

　　1)铺板：将细胞消化后加入培养基终止消化，将细胞吹打均匀，然后按比例铺板。如果不均匀可以用手掌对着一横边和一纵边轻轻拍打，切忌四个边都拍打，这样细胞很容易聚到中间。

　　2)掌握细胞状态，过夜能长满为佳。

　　3)第二天用黄枪头比着直尺(或者枪头，板盖)，垂直在原来的培养基里划痕，每孔1道(也可多划几道，参考细胞状态)，枪头要垂直，不能倾斜。

　　4)用PBS清洗细胞1-2次，去除划下的细胞，加入低血清培养基(或者培养基)；然后去显微镜下拍照，尽量高倍镜低倍镜都拍照，可以事先在板子底部用Marker笔画上小圆圈标记来保证能拍到同一个点，作好记录。

　　5)加药，放入37度5%CO2培养箱，培养时间依照实验要求进行，通常以12h、24h、48h为准。按所需时间节点安排取样拍照时间。

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