病毒保存液病毒灭活效果检测

病毒保存液适用于病毒、流感病毒、手足口病毒等常见病毒样本采集保存运输工作，是采样管内浸末采样拭子病毒样本一种保护病毒的被检测物质的液体，可采集咽拭子、鼻拭子或特定部位组织样本，储存的样本可用于后续的核酸提取或纯化等临床实验。

病毒保存液通常分为两种，一种是非灭活型，能够保护病毒的蛋白和核酸，另一种是灭活型，通常含有灭活病毒的裂解盐，裂解蛋白而保护核酸。

灭活型病毒保存液：主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液，里面添加有高浓度的裂解盐，能够迅速高效地使待测样本利的病毒蛋白裂解失活，可以有效防止感染，同时又含有Rnase酶抑制剂，能保护病毒核酸不被降解，后续的NT-PCR实验只要能检测出病毒的核酸即可以做出诊断。而且能在常温下保存相对较长的时间。

非灭活型保存液：主要是以运送培养基为基础改良的病毒维持液型保存液。这一种是同时保留了病毒的蛋白质外壳以及病毒核酸DNA或者RNA，这样病毒在体外具有蛋白抗原表位和核酸的完整性，当然操作失误时也有一定的感染性风险。采样后长时间保存需要保持严格低温。

中科检测可开展针对流感病毒、肠道病毒、冠状病毒、疱疹病毒等病毒保存液病毒灭活效果检测，病毒保存液检测可针对不同保存温度、不同保存时间等不同条件下的病毒活性及病毒灭活率。

病毒保存液检测方法

1. 试验对象：

毒株:甲型流感病毒HINI (VR- 1469)

细胞: MDCK细胞.

2.试验步骤：

1）取样品病毒保存液（非灭活型） 9.8mL，加入0.2mL病毒原液混匀，分装若干测试液，存至要求温度;

2）保存至对应天数后取出测试液，检测病毒滴度；

a）10倍倍比稀释测试液；

b）将稀释液加入含生长至单层的MDCK细胞的96孔细胞培养板上，并设置正常对照组，加等量培养液；

c）置于35'C、5%CO2的培养箱中孵育60 min后弃去上清液，加入双抗400 IU/mL的维持培养液继续孵育3~5天，每天观察细胞增长状况；

d）当接种病毒的MDCK细胞出现变圆或缩小等病变现象时，记录产生细胞病变的情况;

e）根据Reed-Muench公式计算半数感染量TCID50。

病毒保存液病毒灭活效果检测